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详细的植物组织培养箱培养方法和流程的讲解

点击次数:126 发布时间:2020-08-25
   植物组织培养箱培养指把培养材料放在培养室(有光照、温度条件)里,使之生长,分裂、分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。
  (一)植物组织培养箱培养方法
  1.固体培养法
  即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。是现在常用的方法。该法设备简单,易行。但养分分布不均,生长速度不均衡。并常有褐化中毒现象发生。
  2.液体培养法
  即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。由于液体中氧气含量较少,常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给,采用往复式摇床或旋转式摇床进行培养,其速度一般为50~100转/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。
  植物组织培养箱的技术流程:
  (1)首先无菌培养的建立:任何植物细胞或组织培养体系的建立,都必须采制适宜的外植体。
  (2)诱导外植体生长与分化:将外植体放在培养基里,培养基中含有植物组织正常生长的营养和促使植物进行分化的激素,促使外植体开始分化出新芽。
  (3)愈伤组织的形成:在组织培养中,受伤组织切口表面在适宜条件下长出的一种脱分化的组织堆块,称为愈伤组织(Callus)。此种愈伤组织在适当的培养基上经一定时间即能诱导生长成整株植物。因此愈伤组织既是某种植物代谢产物的来源,又是诱导成株的主要途径之一。
  (4)促进中间繁殖体的增殖:在第二阶段培养的基础上所获得的芽、苗、胚状体和原球茎等等,数量都还不多,也难以种植到栽培介质中去,这些培养的材料可统称为中间繁殖体,它们需要进一步培养增殖,使之越来越多,才能发挥快速繁殖的优势。
  (5)壮苗和生根:在材料增殖到一定数量后,就使部分培养物分流,进入壮苗与生根途径。在生根壮苗培养基上,大多数植物要分离成单苗,有的可分成小丛苗。转移培养后应停止增殖,迅速生根,同时苗也长高,以便于以后移栽。
  (6)试管苗出瓶种植与苗期管理:经过上面几个阶段,小苗已生根成为完整的再生植株,可以被移植到土壤里了。在这个阶段,湿度要求很高,以使它们适应新的环境。每天将盖在植株上的罩子移开一点,整个过程大约两个星期,让植物慢慢适应外界环境。
  实践表明,当植物材料不断地进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明状,呈水迹状,这种现象通常称为玻璃化。它的出现会使试管苗生长缓慢、繁殖系数有所下降。
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